REAL TIME PCR TRONG NGHIÊN CỨU GEN NGƯỜI - HUMAN GENETICS

BRCA SNP genotyping Kit (8 SNPs)

NGHIÊN CỨU GEN NGƯỜI - HUMAN GENETICS

STT

Tên bộ kits

Mô tả tổng quát

Chứng chỉ

BRCA SNP genotyping Kit (8 SNPs)

(xác định các đa hình liên quan đến nguy cơ phát triển ung thư vú và buồng trứng bằng phương pháp realtime PCR)

Phương pháp phát hiện: Rt

Mẫu xét nghiệm: máu ngoại vi toàn phần

Phương pháp tách chiết DNA: PREP-GS-GENETICS, PREP-RAPID-GENETICS

Định dạng bộ kit: non-pipetted (tube nên được mua thêm)

Nhiệt độ bảo quản: +2 .. + 8 ºС; Taq-polymerase: - 20 ºС

Thời hạn sử dụng: 6 tháng

CE/IVD

Có hơn 1 triệu trường hợp ung thư vú hàng năm trên thế giới.

Tỷ lệ tử vong cao do ung thư vú là một trong những vấn đề thường gặp nhất. Có gần 13% tử vong trong năm đầu tiên được chẩn đoán. Rõ ràng, hiệu quả điều trị cao hơn ở giai đoạn đầu của bệnh. Do đó, chẩn đoán kịp thời là một nhiệm vụ cấp bách và có thể làm giảm đáng kể tử vong [7].

Lưu ý rằng ung thư vú là một bệnh lý cực kỳ không đồng nhất (Hình 27).

Hình 27. Mạng lưới gen. Tạo khối u

Người ta biết rằng 5-10% trường hợp ung thư vú và ung thư buồng trứng là di truyền và có thể là do đột biến gen BRCA1 và BRCA2. Cả hai gen đều làm tăng nguy cơ ung thư vú tới 80-85% ở phụ nữ.

Các gen BRCA1 và BRCA2 mã hóa các protein hạt nhân thể hiện ở mọi nơi. Người ta ước tính rằng chức năng của các protein này liên quan đến việc điều chỉnh sửa chữa DNA và duy trì tính nguyên vẹn của bộ gen. Các gia đình mang đột biến BRCA1 và BRCA2 cho thấy sự thừa kế trội hơn về khối u [79].

Nó được chứng minh rằng BRCA1 - liên quan đến ung thư vú - không giống như ung thư bào tử, có tỷ lệ mắc bệnh cao hơn, tỷ lệ cao của các khối u estrogen và progesterone âm tính, tỷ lệ ung thư tủy được phát âm ở dạng xâm nhập lympho, bệnh lý điều trị rõ rệt để hoàn thành hồi quy. Tỷ lệ sống sót của bệnh nhân ung thư di truyền của hệ thống sinh sản nữ cao hơn đáng kể so với tổng số bệnh nhân, bất kể giai đoạn điều trị: tỷ lệ sống 5 năm của bệnh nhân ung thư vú di truyền là 75% ( và 43% cho tất cả các dạng ung thư khác) [8].

Các gen BRCA1 và BRCA2 không hoàn toàn cụ thể đối với ung thư vú. Kiểu gen bệnh lý BRCA1 / 2 làm tăng nguy cơ phát triển ung thư buồng trứng, ung thư dạ dày, ung thư đại tràng, ung thư tuyến tụy, ung thư bàng quang, khối u đầu và cổ, ung thư nội mạc tử cung, ung thư đường mật, cũng như khối u ác tính [140].

Chỉ định xét nghiệm di truyền phân tử:

Ung thư vú ở người trẻ (trước 50 tuổi);
Tiền sử gia đình có người bị ung thư (hai hoặc nhiều người thân máu bị ung thư vú và / hoặc buồng trứng);
Nhiều bệnh ác tính ban đầu ở bệnh nhân hoặc người thân của họ:
Ung thư vú từ hai bên nội ngoại;
Ung thư vú và ung thư buồng trứng;
Các đặc điểm hình thái khác của ung thư vú:
Ung thư vú âm tính ba lần (khối u ER-, PR-, HER2 / neu);
Ung thư biểu mô tủy;
Ung thư buồng trứng;
Ung thư vú ở nam giới trong lịch sử cá nhân và gia đình.

DNA-Technology, cùng với Trung tâm nghiên cứu ung thư Nga Blokhin, đã tiến hành nghiên cứu chung để xác định tỷ lệ 11 đột biến gen BRCA1 và BRCA2 được mô tả trước đây trong mẫu bệnh nhân ung thư vú không được chọn trong dân số Nga về lấy mẫu 1091 người [1] ].

Dựa trên kết quả của nghiên cứu này, một bộ kit được phát triển để xác định các đa hình liên quan đến nguy cơ phát triển ung thư vú và buồng trứng bằng phương pháp realtime PCR (xem Bảng 43 và 44).

Bảng 43. Đa hình di truyền liên quan đến ung thư vú

Gene	Đa hình (đột biến)	Alen nguy cơ	Tỷ lệ		Đánh giá rủi ro cho các kiểu gen khác nhau
BRCA1	185delAG	delAG	0,1%		Ins/Ins – population risk Ins/Del – nguy cơ cao
	4153delA	delA	0,7%		Ins/Ins – population risk Ins/Del – nguy cơ cao
	5382insC	insC	4,0%		Del/Del – population risk Del/Ins – high risk
	3819delGTAAA	delGTAAA	0,2%	Tỷ lệ chung của khoảng 5,9% inan	Ins/Ins – population risk Ins/Del – nguy cơ cao
	3875delGTCT	delGTCT	0,1%	mẫu không được chọn (1091 people)	Ins/Ins – population risk Ins/Del – nguy cơ cao
	300T>G (Cys61Gly)	G	0,4:%		TT – population risk TG – nguy cơ cao
	2080delA	delA	0,2%		Ins/Ins – population risk Ins/Del – nguy cơ cao
BRCA2	6174delT	delT	0,2%		Ins/Ins – population risk Ins/Del – nguy cơ cao

Bảng 44. Thông số kỹ thuật và cung cấp hoàn chỉnh bộ thuốc thử

Số test	48 tests
Định dạng thuốc thử	Not pre-aliquoted
Taq-AT polymerase	1 tube (192 mcl)
Mineral oil	1 vial (7,68 ml)
PCR buffer	1 vial (3,84 ml)
Đa hình được xác định	BRCA1: 185delAG – 960 mcl
	BRCA1: 4153delA – 960 mcl
	BRCA1: 5382insC – 960 mcl
	BRCA1: 3819delGTAAA – 960 mcl
	BRCA1: 3875delGTCT – 960 mcl
	BRCA1: 300T>G – 960 mcl
	BRCA1: 2080delA – 960 mcl
	BRCA2: 6174delT – 960 mcl
C+1 (đồng hợp tử cho alen bình thường) C+2 (dị hợp tử)	1tube(270mcleach) 1tube(270mcleach)
Mẫu xét nghiệm	Máu toàn phần