. Trực tiếp: Không chiết xuất RNA

. Nhanh (< 45 phút) hoặc cực nhanh (< 25 phút) trong 40 chu kỳ

. Multiplex: Đầu dò lên đến 5 plex trong một phản ứng

. Khởi động nóng dựa trên Ab Hệ thống Taq polymerase / Thermostable RTase / UDG

Mô tả

RealHelix™ DirectFast qRT-PCR Kit, một bộ qRT-PCR dựa trên đầu dò, được thiết kế để khuếch đại thời gian thực trực tiếp RNA từ các mô động vật, mô thực vật và các mẫu lâm sàng khác nhau (bao gồm cả máu toàn phần, huyết thanh và tăm bông) mà không cần bất kỳ quá trình thanh lọc RNA nào. Bộ dụng cụ này cho phép phản ứng nhanh hoàn thành chu kỳ qRT-PCR trong vòng một giờ. Hỗn hợp enzyme trong bộ dụng cụ này là sự pha trộn tối ưu của phiên mã ngược, Taq DNA polymerase kết hợp kháng thể  , chất ức chế RNase và uracil-DNA-glycosylase không chịu nhiệt (HL-UDG). Bộ đệm phản ứng chứa tất cả các thành phần cần thiết, bao gồm các thành phần đệm được tối ưu hóa, Mg2 +, dUTP và dNTP. Hệ thống HL-UDG / dUTP được áp dụng giúp loại bỏ ô nhiễm mang theo của các sản phẩm PCR từ các phản ứng trước đó. HL-UDG loại bỏ hiệu quả dư lượng uracil khỏi DNA chứa dU trong quá trình thiết lập và xử lý hỗn hợp PCR.

Dữ liệu

Hình 1. RT-PCR thời gian thực trực tiếp và ghép kênh bằng cách sử dụng RealHelix™ DirectFast qRT-PCR.

Dịch ly giải của gạc có thêm 108 bản sao RNA SARS-CoV-2 đã được chuẩn bị theo quy trình. 1 μl lysate (tương ứng với khoảng 106 bản sao) và RNA virus SARS-CoV-2 (106,105,104, 103 và 102 bản sao) đã được phân tích bằng cách sử dụng ba bộ mồi và đầu dò dành riêng cho mục tiêu khác nhau (gen S, ORF8 và N gen). Các đầu dò được dán nhãn FAM (gen S), HEX (ORF8) và Texas Red (gen N). Phản ứng ghép kênh đã được thử nghiệm bằng cách sử dụng Bộ công cụ RealHelix™ DirectFast qRT-PCR trên thiết bị PCR thời gian thực, Bio-Rad CFX96.

Hình 2. RT-PCR thời gian thực trực tiếp và nhanh chóng bằng cách sử dụng RealHelix™ DirectFast qRT-PCR từ mô chuột.

Dịch ly giải từ máu toàn phần hoặc gan của chuột được điều chế theo quy trình. Mỗi 1 μl lysate và RNA tổng số đã được tinh chế (10, 1, 0,1 và 0,01ng) được phân tích bằng cách sử dụng mồi và đầu dò dành riêng cho gen GAPDH của chuột được dán nhãn FAM trên thiết bị PCR thời gian thực, Bio-Rad CFX96.

Sản pphẩm